一、中藥對照品介紹
對照品定義
對照品系指藥品標準中用于鑒別、檢查、含量測定、雜質和有關物質檢查等,它是藥品標準中重要的組成部分。
對照品使用
1.使用范圍:根據使用目的,鑒別、檢查、含量測定、雜質及有關物質分析等,選擇相應的對照品。
2.使用注意事項:取出產品恢復到室溫后,干燥環境下取樣。取樣結束后,密閉保存。樣品現配現用,使用中嚴防污染。
3.合適的前處理方法:大部分的抗生素對照品使用前不需要干燥處理,而有些對照品需選擇適當的條件進行干燥。
對照品保存注意事項
1.在適當的條件下,在-20℃左右且避光的環境下保存。
2.保持密封、干燥環境下存放。
3.開瓶后建議短期內用完,已超過穩定期的對照品不能使用。
4.同時在重復使用過程中應盡量避免對照品的降解、污染或吸潮。
5.實驗中注意含量測定用對照品與鑒別用對照品區分開來。
二、對照品的制備流程
(一)天然產物的提取
概念:選擇適宜的溶劑和適當的方法,將所要的成分盡可能從天然藥物中提取出來,而雜質盡可能少的被提出過程。
提取方法:溶劑提取法、水蒸氣蒸餾法、升華法。
1.溶劑提取法:根據中草藥中各種成分在不同溶劑中的溶解度不同,選用對有效成分溶解度大、對雜質成分溶解度小的溶劑,將有效的成分從藥材組織內溶解出來的方法。
2.水蒸氣蒸餾法:適用于具有揮發性、能隨水蒸氣蒸餾而不被破壞,難溶或不溶于水的成分提取。
3.升華法:中草藥中一些成分具有升華的性質,可利用升華性直接從中草藥中提取出來。如茶葉中的咖啡因,樟木中的樟腦。
(二)天然藥物的分離
概念:利用混合物中各組分在物理性質或化學性質上的差異,通過適當的裝置和方法,使各組分分配至不同的空間區域或在不同的時間依次分配至同一空間區域的過程。
原理:利用共存成分的性質差異。
1、根據溶解度差別進行分離。
2、根據物質在兩相溶劑中分配比不同進行分離。
3、根據物質的吸附性差別進行分離。
4、根據物質的離解程度不同進行分離。
5、根據物質分子大小差異進行分離進行分離。
6、根據物質的沸點差別進行分離。
(三)天然藥物的純化
1、中低壓制備
中低壓制備是利用色譜的原理,在此基礎上進行加壓、加大洗脫劑的流速,從混合物中分離出相對純凈的單組份物質。
2、高壓制備
(1)在進行梯度設置時,根據產品的性質,注意洗脫劑體積量、產品洗出時間、柱子的壓力等 參數,綜合考慮。
(2)在洗脫的時候,去除前后雜,分段有選擇的進行切峰、檢測,得到需要的純度的化合物,再進行蒸餾,收集產品。
(3)將收集物進一步的處理后,進行分析總結,是否需要進一步的純化。
(四)天然藥物的結構研究
1.化合物的純度判定方法:
(1)結晶形態與色澤:結晶均勻、一致。
(2)熔點與熔距:熔點明確、熔距敏銳。
(3)色譜法:三種以上展開劑展開,呈單一斑點。
(4)液相色譜法
(5)其他方法:質譜、核磁共振等方法。
2.結構研究中的主要方法:
(1)質譜(MS):測定分子量、求算分子式、推斷結構信息。
(2)紅外光譜(IR):測定特征官能團;進行化合物的真偽比較。
(3)紫外光譜(UV)測共軛體系,推斷骨架類型;測定精細結構。
(4)核磁共振(NMR)H-NMR:提供不同質子(氫原子)情況?;瘜W位移,偶合常數及質子數。
三、天然產物分類
(一)化合物分類
1.生物堿:來源于生物界的一類含氮有機化合物。集中在某一器官,在不同植物中含量差別很大。
2.糖和苷:糖及分類單糖、低聚糖、多糖。苷是糖或糖衍生物與另一類非糖物質通過糖的端基碳原子連結而成化合物。
3.醌類:苯醌、萘醌、菲醌、蒽醌。
4.香豆素和木脂素類:簡單香豆素類、呋喃香豆素類、吡喃香豆素類、異香豆素類。
5.黃酮類:顏色:二氫黃酮、二氫黃酮醇不顯色;異黃酮淺黃色?;ㄉ氐念伾呻SpH不同而改變。
6.萜類和揮發油類:甲戊二羥酸衍生,具2或2個以上異戊二烯單位。分類:半萜、單萜、倍半萜、二萜。
7.皂苷類:三萜皂苷、四環三萜、五環三萜、甾體皂苷。
8、強心苷類:強心苷是一類對心臟有顯著生理活性的甾體苷類。
四、檢測方法及常規檢測器
根據中國藥典的檢測方法,使用高校液相檢測,目前,我們所采用檢測方法為面積歸一法,下面就高校液相檢測器,進行簡單的介紹:
液相色譜檢測器分類:
1.紫外可見吸收檢測器(ultraviolet-visibledetector,UVD)
紫外可見吸收檢測器(UVD)是HPLC中應用廣泛的檢測器之一,幾乎所有的液相色譜儀都配有這種檢測器。
光電二極管陣列檢測器(photodiodearraydetector,PDAD)也稱快速掃描紫外可見分光檢測器,是一種新型的光吸收式檢測器。
2.熒光檢測器(fluorescencedetector,FD)
熒光檢測器是一種高靈敏度、有選擇性的檢測器,可檢測能產生熒光的化合物。
3.示差折光檢測器(differentialrefractiveIndexdetector,RID)
示差折光檢測器是一種濃度型通用檢測器,對所有溶質都有響應。
4.電化學檢測器(elec)chemicaldetector,ED)
電化學檢測器主要有安培、極譜、庫侖、電位、電導等檢測器,屬選擇性檢測器,可檢測具有電活性的化合物。
5化學發光檢測器(c。iluminescencedetector,CD)
化學發光檢測器是近年來發展起來的一種快速、靈敏的新型檢測器。
6.蒸發光散射檢測器(Evaporative light Scattering Detector, ELSD)
蒸發光散射檢測器是通用型檢測器,可以檢測沒有紫外吸收的有機物質,如人參皂苷、黃芪甲苷等。